国内外学者对于狼毒的化学研究主要集中在狼毒大戟、月腺大戟、鸡肠狼毒、瑞香狼毒和丝石竹等植物。发现的化学成分主要包括二楷、三、苯乙酮、黄酮、香豆素、生物碱等类型。
2017年,Wangan-hua 等在月腺大戟根部分离并鉴定了7个单和糖,主要为欧侧柏烷类和薄荷烷类。
2005年,H-M Shi等人114]从大戟科植物刮金板(Euphorbia chrysocoma Levl.et Vant.)的根部分离得到一个新的倍半。
目前,从狼毒中发现松香烷 (abietanes)类二共45 个,其结构在 Ci2,13之间存在有一个 不饱和--内酷环,有的还存在有环氧基,属于 C环重排的松香烷二,主要分布在狼毒大戟、月腺大戟和大果大戟等植物中。
阿替生烷(atisanes)属于四环二,由四个六元环骈合而成。在狼毒中主要分布在狼毒大载、大果大载、大狼毒等植物中,共发现 27 个阿替生烷二 。
续随子烷类二属于大环二,其基本骨架为一个五元环与十一元环反式稠合,同时,十一元环与一个三元环顺式稠合。该类二主要分布在大果大戟以及鸡肠狼毒中。
狼毒中分离得到的曼西烷(myrsinols)二(146-194)数量较多,几乎都分布在鸡肠狼毒中。该类二酷结构由一个五元环、一个七元环和一个六元环一起骈合而成。
根据其C环结构的差异又可将曼西烷类二分为四类:曼西烷型(myrisinane,146-175)斯皮尔醇型(sprol,176-184)、优弗利平醇型 (euphoreppinol,185-193)和小狼毒醇型 (proliferol,194)。
巴豆烷(tiglianes)二(195-229)的结构为5/7/6/3的四环体系且A/B环多为反式合,B/C 环反式合,C/D 环为顺式合。结构中A环C-3 位常含有一个aB不饱和基,在自然界中大多数以在 C-12,13 位形成脂肪链的形式存在。主要分布在狼毒大戟、瑞香狼毒以及鸡肠狼毒中。
巨大戟烷(ingenanes)二(230-244)的结构与巴豆烷二相似,其结构特点为5/7/7/3 四环体系,与巴豆烷二不同的是 C环为七元环,C-10和C-之间以酮桥相连且C-1,2 和C-7,8之间常含有双键。自然界中常以在 C-3,20 位与长链脂肪酸形成的形式存在,主要分布在大戟科狼毒中。
从狼毒中分离出的三类化合物主要包括羊毛脂烷、环阿尔庭烷、羽扇豆烷和齐墩果烷等类型。1992 年,曹东等首次从大狼毒中分离得到一个新的三化合物大狼毒醇,对大狼毒的化学成分进行了研究。天南星科植物丝石竹中富含三皂昔,首先是Noboru Kutani等6于1944 年从其根部分离得到丝石竹元(gypsogenin,314)。
羊毛脂烷和甘遂烷构成了狼毒中的四环三类化合物(277-283)其区别在于C-1314 位的两个甲基相对构型相反,且羊毛脂烷 C-20位为S构型,甘烷C-20位为R构型。
齐墩果烷型三在狼毒中分布非常广泛,该类三结构一般都是由五个六元环稠合而成,环上一般有 8 个甲基取代,甲基常被氧化为羚基,被氧化后的羚基也常被昔化、酷化,其中28 位的基更易与糖基形成,例如从丝石竹中分离得到的众多齐墩果烷型三皂类化合物。
苯乙酮类化合物及其糖主要分布在从狼毒大戟和月腺大戟等植物中。1987年,狼毒乙素 (398)和2-基--甲氧基-3-甲基-1-酮-2-B-葡萄糖(403)首次从月腺大中分离得到27。
狼中的类化合物属于简单取代的苯乙酮类,多为甲基或糖昔取代,仍能保持苯乙酮化合物的基本骨架。另外,在月腺大载和狼毒大载中还发现了一些以-CH-相连的苯乙酮的二聚体或三聚体,其中各个苯乙酮结构单元可以有不同程度的甲基化,聚合物之间容易出现同分异构体。
中药狼毒在中国的应用历史十分悠久,主要用来治疗水肿腹胀、痰食虫积、心腹疼痛、症痕积聚、结核等症,其药效显著,但因为有大毒,临床应用也一度受到了限制!189近年来,国内外学者的研究发现狼毒中的二酷、三酷类等化合物具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒等药理活性。
狼毒大戟的水和醇提取物对小鼠移植性肝癌、肺癌具有一定的抑制作用,同样剂量对肝腹水瘤、肉瘤180和胃癌则无显著作用而且腹腔或静脉注射给药作用较好1WangLi-Ping 等119用醇提取狼毒大的根部,再用水取的部分,在体内和体外研究对黑色素瘤细胞的抑制作用。
结果表明狼毒大戟提取物可以剂量依赖性地抑制黑色素瘤细胞的生长,也可以抑制小鼠体内肿瘤的生长。Western blot 表明狼毒大提取物可以显著地降低 Bc1-2 蛋白的表达,升高促凋亡蛋白 Bax 的表达。
同时,狼毒大载提取物在小鼠体内可以显著地降低肿瘤的血管内皮生长因子 (VEGF)肝细胞生长因子/分散因子(HGF/SF) 和骨桥蛋白(OPN)等。
海芋的水煎剂对小鼠 S1o 瘤的抑制率为 29.38%,对裸小鼠人胃腺癌移植瘤的抑制率可达46.30~51.72%。Zhang Wei等利用MTT 法分别检测了海的水提取物对肝癌细胞SMMC-7721和人正常肝L02细胞的毒性结果表明海的水提取物对肝癌细胞具有抑制作用(IC50=19.503.63 g /mL)并且剂量依赖性,毒性远远大于对 L02细胞(IC50=40.483.74 g /mL)。
机制研究表明海的水提取物可以促进SMMC-7721细胞的凋亡,并且通过调控 caspase-3 蛋白和激活MAPKs 的表达,降低ERK 和NK的磷酸化,同时降低 p38的磷酸化。
Liu Xiao-Ni等研究了瑞香狼毒醇提取物对肺癌细胞NCI-H157和NCIH460肝癌细胞 Bel-7402和 Skhep-1 细胞的毒性。
结果瑞香狼毒乙醇提取物过聚胺60%Z醇洗脱部位和反相柱色谱纯甲醇冲洗物对 4 种肿瘤细胞都具有抑制活性,提取物抑制肿瘤的活性强弱依次是反相柱色谱纯甲醇冲洗物大于乙醇提取物过聚酷胺 60%乙醇洗脱部位,最后是反相柱色谱 70%甲醇冲洗物。
反相柱色谱纯甲醇冲洗物可以通过改变细胞形态和降低细胞活力来抑制人肺癌 NCI-H157 细胞的生(IC0 = 18.50 g/mL),并具有剂量和时间的依赖性。
反相柱色谱纯甲醇冲洗物和乙醇提取物过聚疏胺 60%乙醇洗脱部位在体内具有相似的抗肿瘤活性,对 NCI-H460 最为敏感,反相柱色谱纯甲醇冲洗物也许是瑞香狼毒提取物抗肿瘤活性部位。
从鸡肠狼毒中分的续随子二(137139(162-165180190-193可以量地多(LPS的BV-2一(NO)[5962Liu Zhi-Guo 等27)研究发现月腺大中分得到的型二可以明显地抑制LPS 诱导的RAW 264.7 型巨细胞分泌一氧化(NO)。
同时,jlkinolide B (13)也可以减弱 LPS 诱导的组织学改变、肺水肿、炎性细胞的渗透、髓过氧化酶活性,同时降低炎症因子TNF-a,IL-6 以及IL1 的含量。此外jlkinolide B 也可以明显地抑制 LPS诱导的IKBa 的退化NF-kB p65 和 MAPK 的磷酸化,以此对 LPS 诱导的小鼠肝损伤起保护作用。
赵奎君等通过对比12种狼毒药材的醇提取物对强毒人型结核杆(H37Rv)的抑制作用,发现狼毒大载对于结核杆菌具有较强的抑制作用,大狼毒次之。后续报道狼毒大戟的乙酸乙部位和分离出的狼毒乙素对耐药型和非耐药型结核菌均具有较强的抑制作用。
另外,狼毒大戟通过乙酸乙酷热提、乙醚冷提的组分抑菌作用最强。大果大载的氯仿和酸酷取部位同样具有较好的抗菌活性,水提物和正丁醇部位的抗菌活性比较低。
研究表明,从广东狼毒海的根茎中分离得到的一种分量为 11 kDa的蛋白Alocasin具有抗葡萄抱属真菌的作用,还能够减低HIV1逆转录酶的活性。
Ihsan-Ul-Haq等12181利用 DPPH实验测了果大甲醇粗提物和各提取部位的抗氧化活性,结果表明IC50为 7.89-63.35 g/L,酸部位具有强的抗氧化活性另外,利用DPPH法、Marklund、邻二氮菲-Fe2氧化法及磷络合物法测定丝石竹各提取物的抗氧化活性。
结果表明乙酸乙酌提取物具有最强的清除 DPPH 自由基和还原的能力( p0.05),且其清除 DPPH 自由基能力比同度的 BHT 强,其还原能力与 BHT相当;石油醚萃取物具有最强的清除自由基和过氧自由基能力 (p0.05,实验所测浓度下,均比同浓度的 BHT 强。
崔立然等[222)研究发现狼毒多糖可通过增强荷瘤鼠抗肿瘤免疫应答功能,抑制肿瘤细胞在体内转移和复发。另外,还有许多从狼毒中分离得到的单体化合物同样可以增强免疫能力。
例如,从丝石竹根部分离到的a-L-arabinopyranosyl-(1-4)-a-Larabinopyrano syl-(1-3)--D-xylopyranosyl-(1--4)-a-L-rhamnopyranosyl-(1-+2)-D-fucopyranosyl ester (356)可以明显地增强胞的作用,因此该化合物具有增强免疫力的功效。同时,Yuexiandajisu C(125)也具有调节免疫的作用。
樊俊杰等通过瑞香狼毒多糖灌胃给环磷既胺造成免疫抑制模型的小鼠的实验研究表明,瑞香狼毒多糖对小鼠的免疫功能具有一定的调节作用。